Вопрос 61. Лабораторная диагностика малярии

Лабораторная диагностика

1.
Ку-лихорадка

природно-очаговая инфекция с разнообразными
ме­ханизмами заражения, вызываемая
риккетсией Coxiellaburnettiс
резервуарами
возбудителей в природных очагах
(гамазовые и аргазовые клещи). Это мелкие,
кокковидные, палочковидные формы
размером 0,25—1 мкм. Мельчайшие формы
возбудителя проходят через ультрафильтрацию.

Отличаются
полиморфизмом, способны образовывать
эль-формы (L-формы).

Риккетсий
Coxiellabumettiявляются
внутриклеточными пара­зитами.
Культивируются в желточных мешках
развивающихся куриных эмбрионов, на
культурах тканей, на сывороточном агаре.

В отличие от других риккетсий возбудитель
Ку-лихорадки не имеет общих антигенов
ни
с одним из видов протея, обла­дают
фазовой изменчивостью (в РСК антигены
I
фазы обна­руживаются в период
реконвалесценции, а II
фазы — в ранний период болезни).

Из
лабораторных животных наиболее
чувствительны к риккет-сиям
Coxiellaburnettiморские
свинки. После заражения у них развивается
генерализованная инфекция с поражением
внут­ренних органов.

толстая капля на малярию

Риккетсий
Coxiellaburnettiотличаются
относительно высокой
устойчивостью к
ультрафиолетовым лучам. В водопроводной
воде они остаются жизнеспособными до
160 дней, в молоке — 125 дней, масле — 40
дней, мясе — 30 дней.

В сухих фекалиях
инфицированных клещей риккетсий
сохраняют жизнеспособ­ность до 1,5
лет, в сухих фекалиях и моче пораженных
живот­ных — до нескольких недель, в
шерсти животных — до 9—12 мес. Погибают
при кипячении более 10 мин.

Риккетсий
устойчивы к ультрафиолетовому облучению,
к воздействию формалина, фенола, хлорной
извести и других дезинфекторов в обычных
рабочих концентрациях.

2.
Бактериологический
метод основан
на
выделении культуры воз­будителя из
крови, мокроты, ликвора, грудного молока
или мочи больных с использованием
тканевых сред. Для
постановки биоло­гической пробы
используют морских свинок, белых мышей
и крыс. У морских свинок через 7 дней
после заражения разви­вается лихорадка.

Риккетсий
Coxiellaburnettiв
большом количестве накапливают­ся в
печени, селезенке и других органах.
Иногда у морских свинок после заражения
бывает бессимптомное течение ин­фекции,
что заставляет прибегать к постановке
серологических
реакций
с целью окончательной диагностики.

Современная диагностика малярии. Выявление малярийных плазмодиев

Специфичность инфекции удается доказать
иногда только через нескольких пассажей.
Чистые культуры выделяют путем введения
в жел­точный мешок куриных эмбрионов
исследуемого материала.

3.
Серологическая
диагностика —
наиболее проста, доступна и не менее
надежна.

Обычно
применяют реакцию связывания ком­племента
и реакцию агглютинации. В РСК с антигеном
диаг­ностический титр 1 : 8 — 1 : 16
выявляется с 10—12-го дня бо­лезни (с
антигеном II
фазы) и достигает максимального значения
на 3—4-й неделе болезни (с антигеном I
фазы).

Комплемент-связывающие антитела
в низких титрах выявляются у
рекон-валесцентов в течение ряда лет.

Надежным
методом диагностики является
иммунолюминис-центный
метод исследования.

Для
непосредственной и ретроспективной
диагностики Ку-лихорадки предложена
внутрикожная
проба. Трудности
приго­товления стандартного антигена
лишают ее практической цен­ности,
хотя при эпидемиологических и
эпизоотологических обследованиях эта
проба могла бы быть полезной.

1.Рожа

острое, нередко рецидивирующее
инфекционно-аллергическое заболевание,
проявляющееся поражением
кожи с образованием резкоограниченного
очага воспаления и явлениями общей
интоксикации.

Возбудитель
рожи В-гемолитический стрептококк
группы А,

включающей
большое число серологических вариантов
(49 ти­пов). Бета-гемолитические
стрептококки группы А являются
факультативными анаэробами и широко
распространены в ок­ружающей среде,
к условиям которой довольно устойчивы.

Хорошо переносят высушивание, низкую
температуру, при на­гревании до 56 °С
погибают через 30 мин. Дезинфицирующие
средства
(хлорная известь, хлорами, лизол и др.)
в рабочих концентрациях губительно
действуют на стрептококка.

Чувст­вительность
к антибиотикам (пенициллин, тетрациклин,
лево-мицетин и др.) высокая.

2.
Малая
высеваемость стрептококков является,
по-видимому, результатом
подавления их роста более устойчивым
стафило­кокком, а
также реакциями сенсибилизированного
организма.

Ассоциация стрептококка с
другими микробами, чаще со ста­филококком,
имеет значение в ряде случаев при
развитии гнойных местных осложнений,
некроза и сепсиса. В этиологии неосложненных
форм рожи другие микробы, в том числе
ста­филококк, значения не имеют.

Лабораторные
исследования в
постановке диагноза значения не имеют.

1.
Вегетативные
формы микробов без
доступа кислорода относи­тельно
быстро отмирают, особенно
под влиянием гнилостной флоры.

Они
быстро погибают при нагревании до 50 °С
в течение 30 мин, при температуре 75—80 °С
— через минуту, а при воздействии
различных дезинфицирующих средств —
от действия сулемы, формальдегида, хлора
в обычных концентрациях — гибель
воз­будителя наступает через несколько
минут.

К низкой темпера­туре бациллы
сибирской язвы весьма устойчивы.
Сибиреязвенные
споры высокоустойчивы во внешней среде.

В
воде сохраняются жизнеспособными в
течение нескольких лет, в почве — десятки
лет; сухой жар губит их при 140 °С за 3 ч,
ки­пячение — через 45—60 мин. Споры
устойчивы и к дезинфици­рующим
средствам; в шкурах животных, выделанных
дублением, они могут сохраняться живыми
длительное время, засаливание мяса не
уничтожает спор.

Выявление
специфических
свойств и
отношения возбудителя к внешней среде
имеет большое значение в связи с
трудностями дифференциальной диагностики.
В природе широко распро­странены
ложносибиреязвенные
палочки,
которые морфологиче­ски невозможно
отличить.

Помимо этого имеются и другие
спорогенные аэробы, такие, как сенная,
картофельная, капу­стная и корневидная
палочки, которые могут находиться в
раз­личных объектах среды. Из старых
лабораторных культур, почвы и сточных
вод выделен специфический сибиреязвенный
фаг, используемый для дифференциальной
лабораторной диаг­ностики возбудителя
сибирской язвы.

• в
бактериоскопии
нативного
материала;

• посеве его на
питательные среды;

• заражении
животных (биологическая проба);

• постановке
реакции термопреципитации по Асколи.

Для
диагностики сибирской язвы у больных
и ретроспективно­го анализа используют
внутрикожную пробу с антраксилом. Для
лабораторного исследования от больного
в стерильную по­суду берут содержимое
пустулы, гной, отделяемое карбункула,
кровь, мочу, мокроту, испражнения, рвотные
массы, соблюда­ют при этом правила
работы с особо опасными инфекциями.

Исследование
начинают
с
бактериоскопии мазков, окрашенных по
Граму и анилиновыми красками. Окраску
мазков произво­дят также раствором
Ребигера на
предмет обнаружения кап-сульных форм
бацилл сибирской язвы — капсулы
окрашивают­ся в красно-фиолетовый
цвет, бактерии — в темно-фиоле­товый.

Для бактериологического исследования
материал засе­вают в чашки
Петри на
мясо-пептонный агар и в пробирки с
мясо-пептонным бульоном. Через 24 ч
выращивания в термо­стате при 37 °С в
положительных случаях на поверхности
агара можно видеть матовые шероховатые
колонии с ворсистыми краями типа «львиной
гривы», в пробирках с мясо-пептонным
бульоном сибиреязвенный возбудитель
растет на дне пробирки в виде комка
ваты.

Выделенные культуры в мазках
исследуют под микроскопом на морфологию
и в висячей капле — на под­вижность.

Биологическая
проба: окончательное
подтверждение видовой принадлежности
выделенной культуры устанавливают
путем подкожного заражения белых мышей,
морских свинок, кроли­ков эмульсией
из однодневной агаровой культуры.

Наблюде­ние за животными проводят 10
дней. Павших животных вскрывают: делают
мазки-отпечатки из внутренних органов
для микроскопирования, производят
посевы из крови, сердца, селезенки и
инфильтрата на месте инъекции.

Для
ускоренной диагностики сибиреязвенной
инфекции исполь­зуют
иммунофлюоресцентный
метод. Этот
метод состоит в об­работке мазков
культур микробов люминесцентными
сыворот­ками и просмотре их в
люминесцентном микроскопе — бациллы
сибирской язвы выглядят в виде палочек
с ободком, светя­щимся зеленом цветом.

Лаборатория может дать предваритель­ное
заключение по исследуемому материалу
через сутки после его получения и
окончательное — через 3—4 дня после
резуль­татов постановки биологической
пробы.

Реакцию
термопреципитации по Асколи проводят
с целью обнару­жения сибиреязвенного
антигена. Для этого измельчают кусочки
органов трупа, кожи, шерсти животных и
кипятят в физиоло­гическом растворе
10—15 мин.

Полученный термоэкстракт
фильтруют. Фильтрат наслаивают на
преципитирующую сыво­ротку, разлитую
в узкие пробирки.

Малярия

В положительных случаях
на границе обеих жидкостей появляется
мутно-белое кольцо преципитации.

Аллергическая
проба состоит
во внутрикожном введении 0,1 мл антраксина
— антигена, извлекаемого из оболочки
сибиреяз­венного возбудителя. На
месте введения у больных и перебо­левших
сибирской язвой появляются гиперемия
и инфильтрат размером 3,5 х 3 см.


• полярную
туберкулоидную;

• пограничную
туберкулоидную;

• недифференцированную;

• пограничную
лепроматозную;

• полярную
лепроматозную.

Лепроматозная
(узловая) форма характеризуется
разрастанием в слизистых оболочках и
в коже грануляционной ткани, состав­ляющей
основу так называемых лепром, в последних
имеется значительное количество
кислотоупорных микобактерий в ко­же,
лимфатических узлах, слизи носа, зева.


Морфология
и биология лепры: возбудитель
проказы по
морфо­логии сходен с туберкулезной
палочкой. Это прямая или слег­ка
изогнутая микобактерия, сплошная или
зернистая, которая легче, чем туберкулезная,
окрашивается фуксином (без подог­ревания)
и легче обесцвечивается кислотами и
щелочами.

Грамположительна. В лепрозных
узлах (лепромах) палочки Хансена
встречаются в громадном количестве,
лежат значи­тельными скоплениями в
виде «связок сигар».

Многократные
попытки выращивания микробактерии
проказы на питательных средах заставляют
сомневаться в возможности получения
культур микробактерий лепры вне тканей
человека. На глицериновом плацентарном
агаре возбудители лепры мед­ленно
растут в виде складчатого или влажного
налета или пленки, бульон равномерно
мутнеет.

Биологическую
пробу нельзя
воспроизвести — эксперименталь­ные
животные невосприимчивы к лепре.

• кислотоустойчивые
микробактерии, непатогенные для всех
ви­дов животных;


• кислотоустойчивые
микробактерии, растущие только в
пер­вичной культуре;

• микробактерии
некислото- и слабокислотоустойчивые.

2.
Микроскопическое исследование. Диагноз
ставят на основании бактериоскопического
исследования слизи из носа или ткане­вой
жидкости из кожных поражений. Положительные
находки подкрепляют диагноз. При
отрицательном результате делают биопсию
пораженных участков и производят
исследования от­печатков их или
гистологических срезов.

В
лепрозных поражениях имеются очень
характерные «лепроз-ные
клетки», овальные
или круглые, заполненные кислото­устойчивыми
бактериями. Большие сильно раздутые
клетки с бактериями носят название
«ггпрозных
шаров». Гигантские
клетки в лепромах не обнаруживаются.

Лепрозные
микробактерии приходится дифференцировать
с
ту­беркулезными на основании более
легкой окрашиваемости ле­прозных
микробактерий и более легкой их
обесцвечиваемости спиртом и кислотами
после окраски.

Одним из наиболее
упот­ребляемых является способ
Баумгартена —
окрашивают мазок фуксином без подогревания,
обесцвечивают в течение 30 мин в
азотнокислом спирте, промывают в воде
и докрашивают вод­ным раствором
метиленового синего.

Срезы лепром
окраши­вают в том же растворе фуксина
в течение 12—15 мин, обес­цвечивают
полминуты в азотнокислом спирте,
промывают в воде и докрашивают метиленовым
синим. В старых лепромах палочки лепры
окрашены в красный цвет; в свежих
поражениях микробактерии частью синие,
частью красные.

Туберкулез­ные
микобактерии этим методом обычно не
прокрашиваются. Аллергическая
реакция: для
подтверждения диагноза проказы применяют
аллергическую пробу с лепромином
(реакция
Мит-суда).

Лепромин
приготовляют из биопсированных тканей
больных проказой. Через 8—24 ч после
введения в кожу лепромина развивается
инфильтрат с гиперемией.

Однако проба
Мит-суда недостаточно специфична, хотя
и очень распространена.

Перед самым началом приема, пациент обязан оповестить врача о том, что находился в местах, где были отмечены случаи заболевания малярией или же, если он был в непосредственном контакте с зараженным человеком.

Диагностика малярии начинается с опроса больного, который рассказывает доктору о проявившихся симптомах. Малярия протекает по-разному, возможно тяжелое  течение заболевания, характеризующиеся яркой симптоматикой и практически бессимптомное протекание болезни. В обоих случаях, в виду отсутствия подобающего лечения, распространение инфекции приводит к смерти зараженного.

После опроса пациента, врач осматривает кожные покровы больного на предмет сухости и высыпаний, которые могли быть вызваны повышением температуры во время лихорадки. Отмечается, что нередко можно заметить, что зараженный стал неестественно бледным, кожа даже может отдавать в сероватые оттенки, это может быть связанно с тем, что у человека низкий гемоглобин и повышенные эритроциты.

В случае выявления бледной кожи, наряду со специфическими для малярии обследованиями, назначается стандартный при любом обследовании общий анализ периферической крови из пальца. Лабораторное исследование проводится для того, чтобы проанализировать показатели гемоглобина, лейкоцитов, РОЭ и эритроцитов в крови.

Низкий показатель гемоглобина указывает на то, что была нарушена естественная циркуляция крови и пациент страдает опасным последствием малярии – анемией. Анемия вызывает покалывания в руках и головокружения по причине недостаточного обогащения головного мозга и органов человека кислородом.

Повышенные лейкоциты и РОЭ в любом случае будут выявлены при малярии, но врач обращает внимание на их количество. В случае если показатели сильно повышены – инфекция находится уже не на первичной стадии и требуется интенсивное и оперативное лечение.

Большая концентрация в крови белых кровяных телец – лейкоцитов, вызвана реакцией организма на распространяющуюся инфекцию в организме. Повышенный РОЭ указывает на сильный воспалительный процесс, который может быть вызван симптомами малярии – увеличением печени и селезенки.

Повышенные эритроциты могут прямо указывать на концентрацию малярийных плазмодий в организме человека.

Стоит отметить, что завышенные эритроциты могут свидетельствовать и об аллергии, поэтому только на основании повышения этого показателя диагноз поставить невозможно.

Аллергия может проявляться у людей, которые находились в странах, где отмечалась малярия, например в том случае, если были подвержены укусу насекомого, не характерного для места постоянного жительства или же употребляли непривычную пищу.

Последующая, специфическая лабораторная диагностика малярии назначается только в том случае, если у врача есть серьезные подозрения на наличие у пациента опасной инфекции.

В случае выявления серьезных отклонений от естественных показателей в крови, врач назначает не только терапию от малярии (если диагноз подтвердится), но и сопутствующее лечение осложнений, которые уже были вызваны заболеванием.

Существует несколько методов диагностики малярии, которые указывают не только на наличие инфекции в организме человека, но и на стадию ее распространения. Врачи назначают сразу несколько анализов, чтобы изучить полностью всю клиническую картину.

К самым ключевым лабораторным исследованиям относятся следующие:

  • Лабораторная диагностика по изучению толстой капли крови помогает определить вид малярийного плазмодия в организме человека. Отмечается, что это самый доступный по цене анализ. Сбор биологического материала может производиться на любой стадии заболевания.
    При малярии, в общей массе красных кровяных телец просвечиваются эритроциты, которые более бледные и увеличены в размерах. Кроме вида плазмодиев, анализ толстой капли крови определяет и стадию распространения заболевания.
  • Лабораторная диагностика при изучении тонкой капли крови проводится в случае, если результаты исследовании толстой капли крови выявили подозрение на малярию. Этот анализ также помогает выявить плазмодии в организме и определить стадию распространения заболевания.
  • Отмечается иммунологическое исследование одного из видов малярии – тропического. Приведенная диагностика производится зачастую в тех местах, где наиболее распространена эта форма инфекции. Приведенный анализ может осуществить человек и самостоятельно.
    Определение определенного вида белков в крови является эспресс-тестом, а в случае негативного результата, заболевание полностью не исключается, анализ показывает лишь, что в организме пациента не обнаружена тропическая малярия.
  • Существует и другой метод исследования, который носит название серологический. Этот анализ проводится врачом и определяет наличие антител, характерных для заболевания. Приведенная диагностика используется в местах, где малярия не распространена.
    В случае если характерные антитела в крови пациента отсутствуют, опасная инфекция полностью исключается. Биологическим материалом для анализа служит венозная кровь.
    малярия клиника диагностика лечение профилактика

    Малярийное проявление на лице очень схоже с герпесом

При определении малярии с низким уровнем распространения плазмодий, используется иммунологическое исследование, которое носит название полимерно-цепная реакция крови. В качестве биологического материала используется венозная кровь или толстая капля периферической крови из пальца.

Этот анализ намного дороже аналогичных ему. Изучают показатели исключительно опытные лаборанты, это исследование проводится в редких случаях.

Изучение результатов анализов можно доверить только специалисту, неправильное определение диагноза может привести к катастрофическим последствиям.

Когда происходит сбор анализа крови на выявление антител

Исходя из того, что определяются несколько видов инфекции, которую диагностируют у человека, биологический материал для лабораторной диагностики инфекции может отличаться. Как правило, наибольшая результативность исследований отмечается, когда кровь у человека берут во время приступа.

Однако в промежуточный период сбор также может производиться. В зависимости от предполагаемого анализа берут венозную или периферическую кровь из пальца. В случае если поражение эритроцитов превысило 2%, у пациента диагностируется тропическая малярия.

Отсутствует вероятность, что результаты лабораторного исследования будут смазаны, в случае, если сдача крови производилась натощак, и в крови пациента не было большой концентрации противомалярийных или противовоспалительных препаратов. При условии, что данные правила не были соблюдены, врач назначает повторный сбор биологического материала.

Если один анализ выявил только подозрение на инфекцию, диагноз с полной достоверностью поставить не представляется возможным. В обязательном случае проводятся дополнительные лабораторные исследования.

В случае выявления вида малярийных плазмодий и стадии их распространения, врач назначает индивидуальное лечение. Крайне опасно принимать меры самостоятельно, потому, что терапия неподходящими лекарственными средствами может нанести больше вреда, чем пользы. Продолжительность и интенсивность лечения различны для каждого из видов малярии.

4. Исследование комаров на зараженность малярийными паразитами


1.
Паразитологический
диагноз малярии основан
на
обнаружении паразитов в окрашенных
препаратах (толстая
капля и мазок)
крови.
Паразиты
могут присутствовать в крови не только
во время лихорадочных приступов и
промежутков между присту­пами,
следующими один за другим, но и в течение
длительных периодов, на протяжении
которых не наблюдается повышения
температуры.

Понравилась статья? Поделиться с друзьями:
Adblock
detector